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abcam抗體鑒定
日期：2025-05-10 10:09
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摘要：
abcam抗體鑒定
熒光抗體在使用前應(yīng)加以鑒定。鑒定指醫(yī)學(xué)標(biāo)記包括效價(jià)及熒光素與蛋白質(zhì)的結(jié)合比率。抗體效價(jià)可以用瓊脂雙擴(kuò)散法進(jìn)行滴定，效價(jià)大于1:16者較為理想。熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合比率(F/P)的測定和計(jì)算的基本方法是：將制備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0，分別測讀A280 (蛋白質(zhì)特異吸收峰)和標(biāo)記熒光素的特異吸收峰，按公式計(jì)算。
熒光抗體在使用前應(yīng)加以鑒定。鑒定指醫(yī)學(xué)標(biāo)記包括效價(jià)及熒光素與蛋白質(zhì)的結(jié)合比率。抗體效價(jià)可以用瓊脂雙擴(kuò)散法進(jìn)行滴定，效價(jià)大于1:16者較為理想。熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合比率(F/P)的測定和計(jì)算的基本方法是：將制備的熒光抗體稀釋至A2801≈1.0，分別測讀A280 (蛋白質(zhì)特異吸收峰)和標(biāo)記熒光素的特異吸收峰，按公式計(jì)算。
F/P值越高，說明抗體分子上結(jié)合的熒光素越多，反之則越少。一般用于固定標(biāo)本的熒光抗體以F/P=1.5為宜，用于活細(xì)胞染色的以F/P=2.4為宜。
(abcam抗體)抗體工作濃度的確定方法類似ELISA間接法中酶標(biāo)抗體的滴定。將熒光抗體自1：4～1:256倍比稀釋，對切片標(biāo)本作熒光抗體染色。以能清晰顯示特異熒光、且非特異染色弱的*高稀釋度為熒光抗體工作濃度。
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